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T7 DNA聚合酶
貨號:R4123

英文名稱(chēng):T7 DNA Polymerase

分子量:由2個(gè)亞基組成,804kDa多肽(T7噬菌體基因5表達產(chǎn)物)和12kDa硫氧還蛋白(大腸桿菌trxA基因表達產(chǎn)物)

級別:BR
包裝:300u
來(lái)源:兩個(gè)大腸桿菌菌株,一個(gè)菌株含有T7噬菌體克隆基因5,另一個(gè)菌株含有大腸桿菌克隆基因trxA
濃度:10u/ul
活力定義:在37°C條件下,30分鐘內能使10 nmol 的脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM堿性變性的牛胸腺DNA
保存緩沖液組分:20mM 磷酸鉀(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:400mM Tris-HCL(PH7.5,25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT
抑制劑:金屬螯合劑,修飾試劑(無(wú)水醋酸和N-乙基順丁烯二酰亞胺可使3'→5' 外切核酸酶失活,但不影響聚合酶活性
失活:75℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制:測試表明無(wú)內切脫氧核糖核酸酶污染
使用注意:37℃分析時(shí)需要短時(shí)間孵育
性狀:懸浮液,重組酶。T7 DNA聚合酶是一種模板依賴(lài)型DNA聚合酶,催化5'→3'方向的DNA合成。該DNA聚合酶具有高持續合成能力,可持續合成長(cháng)片段DNA。該酶對單鏈和雙鏈DNA具有3'→5'外切核酸酶活性
用途:生化研究。除去殘留的基因組DNA,純化共價(jià)閉環(huán)的DNA分子;長(cháng)片段引物延伸反應;DNA 3'-末端標記;定點(diǎn)突變位點(diǎn)的鏈延伸反應;DNA 5'-突出點(diǎn)位補平;第二鏈cDNA合成;原位檢測凋亡相關(guān)DNA片段
保存:-20°C


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